Tipos de técnicas rotuladas do imunoensaio
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2022-04-29
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LEPU
Radiomarcação, rotulagem enzimática, rotulagem luminescente, rotulagem fluorescente e técnicas de rotulagem imunogold são exemplos de técnicas de imunoensaio rotuladas.
1. Imunoensaio etiquetado de materiais radioativos
Yalow e Berson inventaram o radioimmunoassay (RIA) em 1959, que é uma aproximação revolucionária que combina a tecnologia do traçador do radionuclídeo com a sensibilidade alta e a tecnologia imunoquímica específica.
The labeled immunoassay approach leverages the nuclide marker's amplification effect to raise the lower limit of detection of the material being tested, while employing antibodies or antigens as binding reagents, considerably enhancing the assay's specificity.
2. Imunoensaio etiquetado usando etiquetas fluorescentes
Conn et al. desenvolveram imunoensaio marcado fluorescente (FIA) na década de 1940. O antígeno ou anticorpo é marcado com um material fluorescente que se liga ao antígeno ou anticorpo apropriado, e a intensidade da fluorescência é medida usando um microscópio fluorescente ou irradiação UV. O imunoensaio marcado fluorescente é uma técnica para medir a intensidade de fluorescência e fluorescência usando um microscópio fluorescente ou luz UV.
Although the fluorescent labeled immunoassay approach is very sensitive, fluorescein can be physiologically hazardous, reducing the antibody or antigen's sensitivity and selectivity.
3. Técnica etiquetada do immunoassay com rotulagem da enzima
Após a técnica do anticorpo imunofluorescente e o radioimmunoassay, é uma técnica sorológica nova chave. Em 1966, Nakane et al. e Avrameas et al. relataram o uso de enzimas em vez de anticorpos marcados com fluoresceína para desenvolver a abordagem de anticorpos marcados com enzima (técnica de anticorpos marcados com enzima) para a localização e identificação de antígenos em tecidos biológicos, respectivamente.
Engvall Van Weemen et al. publicaram o teste imunoenzimático marcado em 1971, tornando os anticorpos marcados com enzimas quantitativamente detectáveis pela primeira vez.
Técnicas de imunotransferência baseadas em anticorpos marcados com enzimas foram criadas na década de 1980 para a detecção e identificação de moléculas de proteínas.
As técnicas de rotulagem imunoenzimáticas são agora amplamente empregadas em imunodiagnóstico, detecção e pesquisa em biologia molecular.
4. Imunoensaio etiquetado com rotulagem luminescente
Nações estrangeiras começaram a usar produtos químicos quimioluminescentes para marcar antígenos ou anticorpos por volta do final da década de 1980, resultando no desenvolvimento da tecnologia de imunoensaio de luminescência.
O imunoensaio de luminescência (LIA) é um termo que se refere ao imunoensaio por quimioluminescência (imunoensaio por quimioluminescência, CLIA).
Além disso, também estão disponíveis imunoensaios por eletroquimioluminescência e imunoensaios por quimioluminescência amplificados por enzima (ECLIA).
CLIA was developed by Sohrocler and Halman in the late 1970s, and it combines luminescence's high sensitivity with an immunoassay's specificity. The basic principle of the same enzyme labeling assay is the use of chemiluminescent reaction reagents (can be luminol or catalysts, etc.) labeled antigen or antibody, labeled antigen and antibody, and to be tested after a series of immune reactions, physical and chemical steps (such as centrifugal separation, washing, etc.), and finally to determine the form of luminous intensity determination.
Partículas superparamagnéticas extração 5. Labeled immunoassay
O Teste Imunocromatofráfico Magnético (MICT) é uma mistura de física atual e biotecnologia que foi originalmente empregada no campo da medicina básica para criar e construir ensaios magnéticos [13,14].
Ao contrário de outras técnicas de rotulagem, a rotulagem de partículas magnéticas não é afetada por impurezas coloridas, permitindo que seja usada para quantificar diretamente substâncias coloridas, como sangue, alimentos e esgoto. A premissa é que nanopartículas superparamagnéticas são utilizadas como marcadores, e o impacto do campo magnético local das partículas magnéticas ligadas ao complexo imune é monitorado por um aparelho de detecção magnética muito sensível para produzir um resultado quantitativo do analito sob investigação.
